17.2.2.6 测定

(1)液相色谱条件

色谱柱：YMCC18，3μm，150mm×2.1mm(内径)或相当者；流动相：乙腈-0.005mol/L甲酸容液，梯度洗脱；乙腈：15%～80%(7min内线性增加)，80%保持2min，80%～15%(0.01min内线性递减)，15%保持11min；流速：0.25mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL。

(2)质谱条件

离子化模式：电喷雾电离正离子模式(ESI+)；质谱扫描方式：多反应监测(MRM)；分辨率：单位分辨率：雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适气体；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求；喷雾电压、去集簇电压、碰撞能等电压值应优化至最佳灵敏度；16种苯并咪唑类药物的定性离子对、定量离子对和去簇电压、碰撞气能量、参考保留时间见表17-16。

表17-16 16种苯并咪唑类药物和代谢物的参考保留时间、参考质谱参数

(3) 定性测定

被测组分选择1个母离子，2个子离子，在相同试验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之内；当样品谱图中被测组分监测离子的相对离子丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的监测离子的相对离子丰度进行比较，偏差不超过表1-5规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。

(4) 定量测定

在仪器最佳工作条件下，将混合标准工作溶液进样，以峰面积为纵坐标，混合标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。16种苯并咪唑类药物和代谢物标准物质的多反应监测(MRM)色谱图见图17-4。

图17-416种苯并咪唑类药物和代谢物标准物质的多反应监测(MRM)色谱图
(a)奥芬达唑；(b)芬苯达唑；(c)阿苯达唑；(d)噻苯咪唑；(e)噻苯咪唑酯；(f)甲苯咪唑；(g)氟苯咪唑；(h)氧苯达唑；

(i)阿苯达唑-2-氨基砜；(j)阿苯达唑亚砜；(k)奥芬达唑砜；(1)阿苯达唑砜；(m)2-氨基氟苯咪唑；(n)氨基甲苯咪唑；(o)羟基甲苯咪唑；
(p)5-羟基噻苯咪唑；