18.2.1.1 适用范围

适用于液态奶(包括原料奶、纯牛奶、脱脂牛奶)和奶粉(包括纯奶粉、脱脂奶粉和婴幼儿配方奶粉)中左旋咪唑残留量的测定。牛奶中左旋咪唑检测限为0.4μg/kg；奶粉中左旋咪唑检测限为3.2μg/kg。

18.2.1.2 方法原理

在碱性环境下用乙酸乙酯提取牛奶和奶粉试样中的左旋咪唑残留，用1000)(浓缩液)" href="/p80/p11680.html">稀盐酸将提取液中左旋咪唑转化为盐酸左旋咪唑并反提到盐酸层，强阳离子交换固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

18.2.1.3 试剂和材料

乙酸乙酯、乙腈、甲醇：色谱纯；氢氧化钠、浓盐酸、氨水、氯化钠：分析纯；甲酸：优级纯；无水硫酸钠：用前在650℃灼烧4h，置于干燥器中冷却后备用。

0.1%甲酸溶液：取1mL甲酸，用水定容至1000mL。当天配制；0.2mol/L盐酸溶液：取18mL盐酸，用水定容至1000mL；10mol/L氢氧化钠溶液：称取40g氢氧化钠，用水溶解并定容至100mL；氨水-甲醇溶液(1+3，v/v)：量取50mL氨水与150mL甲醇混合，摇匀。

盐酸左旋咪唑标准品(levamisole hydrochloride，CAS 16595-80-5)：纯度≥98%。

标准储备溶液：准确称取适量的标准品，用甲醇溶解、转移至50mL棕色容量瓶中并定容至刻度。该溶液浓度为1mg/mL。储备液贮存在-18℃冰柜中，有效期为半年。

标准中间溶液：吸取1.00mL标准储备溶液，移入100mL棕色容量瓶，用水定容，该溶液浓度为10μg/mL。0～4℃冰箱保存。

标准工作溶液：根据需要吸取适量标准中间溶液，用流动相稀释至所需浓度，使用前配制。强阳离子交换固相萃取柱或相当者：3mL，500mg。使用前依次用甲醇3mL、水3mL和0.2mol/mL盐酸1mL活化，保持柱体湿润。

18.2.1.4 仪器和设备

液相色谱-串联质谱联用仪：配有电喷雾离子源(ESI)；固相萃取净化装置；分析天平：感量0.1mg，0.01g；旋涡混匀器；超声波清洗器；离心机：带有50mL螺口聚丙烯离心管；移液器：1mL，2mL；氮气吹干仪；样品瓶：2mL。

18.2.1.5 样品前处理

(1)试样制备

从全部样品中取出有代表性样品约1kg，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封后作为试样，标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。将试样于4℃保存。

(2)提取

a.牛奶样品称取10g混匀的试样(精确至0.01g)于50mL聚丙烯离心管中，加入10mol/mL氢氧化钠0.1mL、氯化钠约5g和乙酸乙酯20mL，涡旋混匀1min，振荡10min，以4000r/min离心10min。取上层乙酸乙酯10mL于另一个50mL聚丙烯离心管中，加0.2mol/L盐酸20mL，振荡10min，以2000r/min离心5min。取下层盐酸溶液10mL，待净化。

b.奶粉样品称取12.5g奶粉于烧杯中，加适量35～50℃水将其溶解，待冷却至室温后，用水定容至100mL，充分混匀。量取10mL溶液于50mL聚丙烯离心管中，按牛奶样品提取步骤操作。

(3)净化

将所得的提取液10mL加载到SCX小柱，依次用水3mL、0.2mol/L盐酸1mL和甲醇3mL淋洗，用氨水-甲醇溶液4.0mL洗脱。用氮气吹干仪将洗脱液吹干，用流动相定容至1mL，过0.2um滤膜。供液相色谱-串联质谱测定。