无菌室(洁净室)是微生物检验室的核心。无菌室一般是在微生物实验室内开辟的一个独立小房间。无菌室的规划设计、建设要符合《洁净室施工及验收规范》(GB50591-2010)的要求。

(一)无菌室洁净标准

无菌操作间洁净度应达到10000级，超净工作负清净度应达到100级，室内温度维持在18～27℃，湿度保持在30%～70%。具体要求见表4-3。

表4-3 无菌室(洁净室)空气洁净度级别

注：1.浮游菌m3和沉降菌/皿可任测一种。

2.100级洁净室(区)0.8m高工作区的截面最低风速：垂直单向流0.25m/s，水平单向流0.35m/s。

(二)无菌室操作规程

(1)无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。

(2)无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证洁净度符合要求。根据无菌室的净化情况和空气中含有的杂菌种类，可采用不同的消毒剂，如甲醛、乳酸、臭氧、3%过氧化氢气溶胶喷雾(20mL/m3)、戊二醛(配成1%浓度喷洒)、5%过氧乙酸气溶胶喷雾(2.5mL/m2)等。

(3)工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服、鞋、帽子、口罩和手套。

(4)无菌室使用前，应将所有物品置于操作部位(待检物除外)，然后打开紫外灯杀菌30min以上，并同时打开超净工作台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再打开紫外灯灭菌20min。

(5)凡带有活菌的物品，必须经高压灭菌后才能清洗或丢弃。

(6)每2～3周用3%石炭酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌椅及地面。

(7)无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的营养琼脂平板3～5个，分别放置在工作位置的左、中、右等处，开盖暴露30min后，倒置于30～35℃培养箱内培养48h，取出检查。100级洁净室平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平板杂菌数平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。

文章来源：《农产品质量安全检测》

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