5.2.1.8 线性范围和测定低限

配制含哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、萘夫西林浓度分别为1.0ng/mL、5.0ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL；阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林浓度分别为2.0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、400ng/mL的样品基质混合标准溶液，在选定的条件下进行测定，进样量为20uL，用峰面积对标准溶液中各被测组分的浓度作图，哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、萘夫西林的绝对量分别在0.02～4ng范围；阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林的绝对量分别在0.04～8ng范围内均呈线性关系，符合定量要求，其线性方程和校正因子见表5-10。

表5-10 9种青霉素线性方程和校正因子

在该方法操作条件下，9种青霉素在添加水平0.25～20μg/kg(LOD～10 LOD)范围时，各自的测定响应值在仪器线性范围之内。同时，样品中萘夫西林的添加浓度为0.25μg/kg；青霉素G的添加浓度为0.5μg/kg；哌拉西林、青霉素V、苯唑西林的添加浓度为1.0μg/kg；阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林的添加浓度为2.0ug/kg时，所测谱图的信噪比远大于10。因此，确定本方法的检出限，萘夫西林为0.25ug/kg；青霉素G为0.5μg/kg；哌拉西林、青霉素V、苯唑西林为1.0ug/kg；阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林为2.0μg/kg。

5.2.1.9 方法回收率和精密度

用不含青霉素的样品进行添加回收率和精密度实验,样品中添加0.25～20μg/kg(1 LOD～10 LOD)四个不同水平的9种青霉素标准后，摇匀，使标准物与样品充分吸收，然后按本方法进行提取和净化，用高效液相色谱-串联质谱仪测定，其回收率和精密度见表5-11。从表5-11可以看出，本方法回收率数据在73.1%～105.6%之间，室内四个添加水平的相对标准偏差均在3.29%～9.87%之间。

表5-11 9种青霉素添加回收率实验数据(n=10)