19.2.1.6 测定

(1)液相色谱条件

色谱柱：Atlantis C18，3.5μm，150mm×2.1mm(内径)或相当者；柱温：45℃；进样量：20μL；流动相及流速见表19-2。

表19-2 液相色谱梯度 洗脱条件

(2)质谱条件

离子源：电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测(MRM)；电喷雾电压(IS)：4500V；辅助气(AUX)流速：7L/min；辅助气温度(TEM)：450℃；聚焦电压(FP)：140V；碰撞室出口电压(CXP)：12V；定性离子对、定量离子对，采集时间、簇电压及碰撞能量见表19-3。

表19-3 硫脲嘧啶、甲基硫脲嘧啶、正丙基硫脲嘧啶、它巴唑、巯基苯并咪唑的质谱参数

(3)定性测定

每种被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质和内标物的保留时间之比，也就是相对保留时间，与混合基质标准校准溶液中对应的相对保留时间偏差在±2.5%之内；且样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的混合基质标准校准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表1-5规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。

(4) 定量测定

内标法定量：用仪器软件中的内标定量法定量。

外标法定量：在仪器最佳工作条件下，对基质混合标准校准溶液进样，以峰面积为纵坐标，基质混合校准溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。五种硫脲嘧啶的标准物质和内标物衍生物的多反应监测(MRM)色谱图见图19-16。

图19-16 五种硫脲嘧啶标准物质及内标物衍生物的多反应监测(MRM)色谱图