一、分布及危害

单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)广泛存在于自然界中，在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播。单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌，也是最为常见的食源性病原菌，世界卫生组织将其列为20世纪90年代食品中四大致病菌之一。人类多通过与带菌动物的直接接触或食用带菌动物的肉和奶感染的。据报道，健康人粪便中单核细胞增生李斯特氏菌的携带率为0.6%～16%，有70%的人可短期带菌，4%～8%的水产品、5%～10%的奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的家禽均被该菌污染。人主要通过食入软奶酪、未充分加热的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、卷心菜色拉、芹菜、番茄、法式馅饼、冻猪舌等而感染。孕妇、婴儿及免疫力低的成年人特别容易受感染。李斯特菌病的病症包括发热、肌肉疼痛，有时会有肠胃的症状如恶心或腹泻，严重时会出现脑膜炎或败血症，李斯特菌病的死亡率可高达三至八成。

二、检验方法

按照GB4789.30-2016中第一法进行，检验程序见图4-8。

图4-8 单核细胞增生李斯特氏菌检验程序

三、注意事项

(一)平板分离

单核细胞增生李斯特氏菌在科玛嘉李斯特显色培养基上的典型菌落形态为规则蓝色菌落带有透明晕环(直径<3mm)，见彩图14。菌落周围存在透明晕环是单核细胞增生李斯特氏菌区别于其他李斯特菌属的重要特征，需要注意的是，虽然标准中规定的培养时间是24～48h，但有些菌株培养24h不会出现透明晕环，培养30h左右才能看到明显的透明晕环。为了防止误判，培养时间最好定为48h。部分伊氏李斯特菌有时出现和单核细胞增生李斯特氏菌相似的菌落，但伊氏李斯特菌是食品工业中一种罕见菌。蜡状芽孢杆菌可产生蓝色菌落带晕环，但菌落不规则，直径较大，可与单核细胞增生李斯特氏菌区分开来。

单核细胞增生李斯特氏菌在PALCAM平板上的菌落形态为小的灰绿色菌落，周围有棕黑色水解圈，如彩图15所示。该培养基不能区分开单核细胞增生李斯特氏菌和李斯特属其他种，所有李斯特属的细菌在该培养基上的菌落形态都一样。

(二)染色和形态观察

革兰氏染色时菌龄不能超过48h，因为该菌幼龄时呈革兰氏阳性，但超过48h易变为革兰氏阴性。李斯特氏菌为小的、类似球形杆菌，在有些培养基中稍弯，两端钝圆，单个、成短链、细胞彼此连成V形，或成群的细胞沿长轴方向平行排列，在较老的或生长不良的培养物中，可能形成丝状。无芽孢，无荚膜。

(三)动力试验

国标方法中没有给出动力试验的培养温度，单核细胞增生李斯特氏菌在20～25℃培养有动力，穿刺培养2～5d可见倒立伞状生长。