7.2.1.6测定

(1)液相色谱条件

1)猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝、鱼类、虾蟹类和贝类样品

色谱柱:Atlantis-C18，3.5μm，150mm×2.1mm(内径)或相当者；柱温:35℃；进样量:40μL。流动相及流速见表7-2。

表7-2 液相色谱梯度洗脱条件

2)牛奶或奶粉样品

色谱柱：AtlantisC18，3.5um，150mm×2.1mm(内径)或相当者；柱温：35℃；进样量：40μL。梯度洗脱参考条件见表7-3。

表7-3 液相色谱梯度洗脱条件

3)蜂蜜样品

色谱柱：ZORBAXSB-C18，3.5um，150mm×2.1mm(内径)或相当者；柱温：30℃；进样量：40μL。流动相及流速见表7-4。

表7-4 液相色谱梯度洗脱条件

(2)质谱条件

离子源：电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测(MRM)；电喷雾电压(IS)：5000V；辅助气(AUX)流速：7L/min；辅助气温度(TEM)：480℃；聚焦电压(FP)：150V；碰撞室出口电压(CXP)：11V；去簇电压(DP)：45V；四种硝基呋喃代谢物和内标衍生物的定性离子对、定量离子对，采集时间及碰撞能量质谱参数见表7-5。

表7-5 四种硝基呋喃代谢物和内标衍生物的质谱参数

(3)定性测定

每种被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质和内标物的保留时间之比，也就是相对保留时间，与混合基质标准校准溶液中对应的相对保留时间偏差在±2.5%之内；且样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的混合基质标准校准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表1-5规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。

(4) 定量测定

内标法定量:在仪器最佳工作条件下，四种硝基呋喃代谢物的混合基质标准校准溶液进样测定，以混合基质标准校准溶液中待测物浓度为横坐标，以待测物的峰面积与其同位素内标物的峰面积的比值为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线通过仪器软件中的内标定量程序对待测样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。四种硝基呋喃代谢物和内标物衍生物的标准物质多反应监测(MRM)色谱图见图7-3。

图7-3 四种硝基呋喃代谢物及内标物衍生物的多反应监测(MRM)色谱图