18.1.4残留分析技术

关于动物源基质中噻咪唑残留分析的文献几乎没有，本方法主要介绍左旋咪唑的残留分析技术。左旋咪唑可以用乙腈、乙酸乙酯、正已烷-异戊醇等有机试剂从动物组织(血液)中提取出来，然后采用液液分配、固相萃取等方法净化，最后采用生物法、免疫法以及仪器方法等进行测定。

18.1.4.1 前处理方法

(1)提取方法

1)液液萃取(liquid liquid extraction，LLE)

左旋咪唑可以用乙腈、乙酸乙酯、正己烷-异戊醇、氯仿等有机试剂提取，且常用盐酸盐，在碱性条件下提取效率更高。

Crooks等直接采用乙腈提取牛肝脏和奶中的左旋咪唑残留，提取液用免疫生物传感器测定。肝脏组织和奶中的检测限(LOD)分别为6.8μg/kg和0.5μg/kg；肝脏在100μg/kg添加浓度水平，奶在2μg/L添加浓度水平的批间变异系数(CV)分别为6.7%和2.4%，但没有介绍回收率。Whelan等采用含有硫酸镁和氯化钠的乙腈提取牛乳中的左旋咪唑，方法的检测限(CCa)为0.83ug/kg，检测能力(CCβ)为1.4μg/kg，回收率在94%～104%范围内。

徐静等在KOH碱性溶液中将左旋咪唑盐酸盐转化为左旋咪唑，以乙酸乙酯进行提取。分别以HCl溶液、KOH-二氯甲烷体系进行两次液液分配净化，依次消除提取液中的脂溶性杂质和水溶性杂质，最后进入气相色谱-质谱(GC-MS)检测。方法的定量限(LOQ)为5μg/kg；鸡肝、鸭肝、兔肝和猪肝样品中的加标回收率范围为76%～106%，相对标准偏差(RSD)小于9%。曾勇等在碱性碳酸盐缓冲液条件下用乙酸乙酯提取左旋咪唑。在猪、鸡的肌肉、脂肪和肾脏中的LOD均为2ug/kg，LOQ均为5μg/kg；在猪、鸡的肝脏中的LOD为2μg/kg，LOQ为10μg/kg；在不同添加浓度水平下进行添加回收试验，各组织平均回收率在70%～110%之间。

Baere等采用正己烷-异戊醇混合溶液(95+5，v/v)，在氢氧化钠碱性溶液条件下对猪血浆中左旋咪唑进行了提取。液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)和高效液相色谱紫外检测法(HPLC-UV)的LOD分别为9μg/L和77μg/L，LOQ分别为25μg/L和100ug/L；回收率大于90.9%。Cherlet等也采用正己烷-异戊醇(95+5，v/v)提取猪组织中的左旋咪唑，LC-MS/MS检测。猪肌肉、肾脏、脂肪和皮肤样品的LOQ为5μg/kg，猪肝脏为50ug/kg，LOD在2～4μg/kg范围内；在10ug/kg和大于10μg/kg浓度时，方法准确度的范围分别为-30%～+30%和-20%～+10%，精密度在最大RSD范围内。De Ruyck等建立了牛奶中驱虫药残留的高效液相色谱(HPLC)检测方法。在磷酸氢二钠碱性溶液环境下用氯仿提取左旋咪唑，方法的回收率在68%～85%范围内，LOD为0.5ug/L，LOQ为1.4ug/L。

2)超声辅助萃取(ultrasonic-assisted extraction，UAE)

UAE是利用超声波的空化效应增加溶剂穿透力，提高药物溶出速度和溶出次数，从而增加物质成分的扩散，缩短提取时间，加速提取过程。薄海波等建立了牛奶和奶粉中左旋咪唑残留量的测定方法。在氢氧化钠碱性溶液环境下，用乙酸乙酯超声波提取试样中的左旋咪唑，超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测，牛奶和奶粉中LOQ分别为0.4μg/kg和2μg/kg，回收率为64.5%～102%。

3)加电中空纤维膜萃取(electromembrane extraction)

近年来，中空纤维膜萃取技术作为一种样品前处理方法，被广泛应用于环境分析、药物分析以及食品和饮料检测等领域。中空纤维膜萃取技术具有样品无需处理即可直接进样，对分析物具有预富集作用，基体消除，成本低廉，易与气相色谱、高效液相色谱和离子色谱联用等优点。但分析物穿透中空纤维膜膜孔内支撑液膜的运输机理是基于被动扩散，因此，常常需要30～60min才能达到萃取平衡。为了克服传统中空纤维膜萃取技术耗时的缺点，加电中空纤维膜萃取的新型样品前处理方法得以出现。电动力迁移在加电中空纤维膜萃取中起到了主导作用，因此在很短的时间内就能取得良好的萃取效果。Seidi 等建立了HPLC-UV测定生物体液中左旋咪唑的分析方法。4 mL不同酸化生物基质中的左旋咪唑，通过固定在多孔中空纤维孔中的含5%三-(2-乙基已基)磷酸酯的2-硝基苯基辛基醚的薄层迁移出来，进入存在于纤维内腔的20μL酸性水受体溶液。作者对影响电迁移的参数进行了调查和优化，200V操作15min，不同生物基质中左旋咪唑的回收率在59%～65%之间，这相当于富集因素在118～130的范围内，RSD在5.6%～9.7%之间；血浆、尿液和唾液的校准曲线线性范围分别为0.5～10μg/mL、0.2～ 10μg/mL和0.1-10μg/mL，LOD分别为0.1μg/mL、0.07μg/mL和0.05μg/mL，LOQ为0.5μg/mL、0.2μg/mL和0.1μg/mL。