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氨基酸和蛋白质代谢

[db:作者] / 2022-11-28 00:00

1.靛基质试验 某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。

试验方法:将待测纯培养物小量接种于色氨酸肉汤培养基中,于(36±1)℃培养24h时后,取约2mL培养液,加入Kovacs氏试剂2~3滴,轻摇试管,呈红色为阳性,或先加少量乙醚或二甲苯,摇动试管以提取和浓缩旋基质,待其浮于培养液表面后,再沿试管壁缓慢加入Kovacs氏试剂数滴,在接触面呈红色,即为阳性。

2.氨基酸脱羧酶试验 具有氨基酸脱羧酶的细菌,能使氨基酸生成胺,使培养基pH升高,使培养基指示剂显色。培养基变紫色为阳性反应,而培养基不变色为阴性反应,本试验一定要设空白对照。培养时需用液态石蜡封盖,阻止空气的氧化作用。本试验主要用于肠杆菌科细菌的鉴定,如沙门菌属中除伤寒沙门氏菌和鸡沙门菌外,其余沙门氏菌的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶均为阳性。志贺菌属除宋内氏志贺氏菌和鲍氏志贺菌B型的鸟氨酸为阳性外,其他志贺氏菌均为阴性。

3.硫化氢试验 某些细菌能分解含硫氨基酸生成硫化氢,与亚铁离子或铅离子结合形成黑色沉淀物。硫化氢试验主要用于鉴别肠杆菌科细菌。沙门菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属、爱德华菌属等硫化氢试验结果为阳性,其他菌属大多为阴性。但沙门菌属中亦有部分硫化氢阴性菌株,如甲型副伤寒沙门氏菌、仙台沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌等。

4.苯丙氨酸试验 细菌能将苯丙氨酸脱氨变成苯丙酮酸,酮酸能使三氯化铁指示剂变绿色。变形杆菌及普罗菲登斯菌有苯丙氨酸脱氨酶的活力,变绿色者为阳性。