1.2.1 河豚鱼、缓鱼、烤鳗、牛奶和奶粉中12种β-受体激动剂类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法啊

1.2.1.1 适用范围

适用于河豚鱼、鳗鱼、烤鳗、牛奶和奶粉中溴布特罗、塞曼特罗、克伦特罗、克伦潘特、羟甲基氨克伦特罗、苯氧丙酚胺、马布特罗、莱克多巴胺、利托君、沙丁胺醇、特布它林和妥布特罗等12种β-兴奋剂残留量的液相色谱-串联质谱测定。

1.2.1.2 方法原理

样品经稀酸水解、高氯酸沉淀蛋白后，残留的β-兴奋剂以乙酸乙酯与异丙醇混合溶剂萃取，混合型阳离子交换反相吸附固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱进行测定，内标法定量。

1.2.1.3 试剂和材料

甲醇、乙腈和乙酸铵均为色谱纯；异丙醇、乙酸乙酯、甲酸、高氯酸、盐酸、氢氧化钠、氨水和氯化钠均为分析纯。

10mol/L氢氧化钠溶液：称取40g氢氧化钠至100mL水中，混匀。

0.1mol/L高氯酸溶液：移取0.4mL高氯酸至100mL水中，混匀。

0.1mol/L盐酸溶液：移取0.85mL盐酸至100mL水中，混匀。

5mmol/L乙酸铵溶液：称取0.385g乙酸铵至约800mL水中，加入2mL甲酸，定容至1000mL，混匀。

甲醇-0.1%甲酸溶液：移取0.1mL甲酸于约50mL水中，加入10mL甲醇，以水定容100mL，混匀。

标准物质：溴布特罗、塞曼特罗、克伦特罗、克伦潘特、羟甲基氨克伦特罗、苯氧丙酚胺、马布特罗、莱克多巴胺、利托君、沙丁胺醇、特布它林和妥布特罗，纯度大于98.0%。

内标标准物质；盐酸克伦特罗-D9、盐酸莱克多巴胺-D5、沙丁胺醇-D3，纯度大于98.0%。

标准储备液(100ug/mL)：准确称取适量(精确到0.1mg)的溴布特罗、塞曼特罗、克伦特罗、克伦潘特、羟甲基氨克伦特罗、苯氧丙酚胺、马布特罗、莱克多巴胺、利托君、沙丁胺醇、特布它林和妥布特罗，用甲醇分别配制成100μg/mL的标准储备液，-20℃冰箱中保存。

混合标准储备液(1ug/mL)：分别准确量取1.0mL的标准储备液至100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，-20℃冰箱中保存。

内标储备液(100ug/mL)：准确称取适量(精确到0.1mg)的克伦特罗-D9、莱克多巴胺-D5、沙丁胺醇-D3对照品，用甲醇配制成100ug/mL的标准储备液。

内标工作液(10ng/mL)：分别准确量取适量的同位素内标储备液至同一容量瓶中，用甲醇稀释定容成浓度为10ng/mL的同位素内标工作液，-20℃下冰箱中保存。

基质标准工作溶液：以空白基质溶液将混合标准储备液与内标工作液稀释至适当浓度，现用现配。混合型阳离子交换反相吸附固相萃取柱：60mg/3mL，使用前依次用3mL甲醇和3mL水活化，保持柱体湿润。

1.2.1.4仪器和设备

高效液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾电离(ESI)源；天平：感量0.1mg和0.01g：组织捣碎机：高速冷冻离心机：转速可达15000r/min，制冷可达4℃；离心机：4000r/min；漩涡振荡器；电热恒温振荡水槽；pH计：旋转蒸发仪；固相萃取装置；氮吹仪。