12.2.2.8 线性范围和测定低限

分别配制含土霉素、四环素、金霉素、强力霉素浓度分别为0.01μg/mL、0.02μg/mL、0.04μg/mL、0.06μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.3μg/mL、0.4μg/mL、0.5μg/mL、0.6μg/mL、0.7μg/mL、0.8μg/mL、0.9μg/mL、1.0μg/mL的混合标准溶液，在选定的色谱条件下进行测定，进样量为100mL，用峰高对标准溶液中各被测组分的绝对量作图，土霉素、四环素、金霉素、强力霉素的绝对量分别在1～100ng、1～90ng、1～100ng、1～100ng范围内均呈线性关系，符合定量要求，其线性方程和校正因子见表12-17。

表12-17 土霉素、四环素、金霉素、强力霉素线性方程和校正因子

由此可见，在该方法操作条件下，土霉素、四环素、金霉素、强力霉素在添加水平0.01～0.6mg/kg范围时，响应值在仪器线性范围之内。同时，样品添加0.06μg的土霉素、四环素、金霉素、强力霉素标准或添加浓度均为0.01mg/kg时，所测谱图的信噪比分别为17倍、12倍、5倍、5倍，高于仪器最小检知量，因此，可以确定本方法测定低限为0.01mg/kg，完全能满足欧盟进口蜂蜜对四环素族抗生素残留的要求。

12.2.2.9 方法回收率和精密度

用不含四环素族抗生素的蜂蜜样品进行添加回收和精密度实验，样品添加不同浓度标准后，摇匀，放置1h，使标准样品充分吸收，然后按本方法进行提取和净化，用高效液相色谱仪测定，其回收率和精密度见表12-18。

表12-18 土霉素、四环素、金霉素、强力霉素回收率(%)和精密度实验数据(n=10)

从表12-18 中回收率及精密度数据可以看出，本方法回收率数据全部在70%～120%之间，室内三个水平变异系数均在17%以内。

12.2.2.10 重复性和再现性

在重复性试验条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r)，如果差值超过重复性限(r)，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。在再现性试验条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)。被测物的含量范围、重复性和再现性方程见表12-19。

表12-19 含量范围及重复性和再现性方程