3)固相微萃取( solid phase microextraction，SPME)

SPME技术是一种相对较新的样品处理技术，可在线进行色谱分析。基质(气体和液体)中的待测物萃取后吸收进入一种比毛细管厚的薄层硅胶树脂，然后用液相或气相的方法转移待测物进入液相或气相色谱分析，提高净化效率，减小溶剂污染。

Queiroz等应用SPME同时净化测定血浆中苯巴比妥、苯妥英、卡马西平、卡马西平环氧化物、拉莫三嗪和扑米酮等6种药物。优化后萃取条件为： 1.0 mL血浆用15%氯化钠和3 mL磷酸钾缓冲液(pH 7.0)改性， 65 mm聚乙二醇二乙烯基苯纤维于30℃萃取30 min， 2500 r/min搅拌15 min。GC-MS测定，线性范围为0.05 ～40.0 μg/mL，血浆样品LOQ为0.05 ～0.20 μg/mL，回收率为90%～ 144%，cV为3.22%～7.73%。Mullett 等应用限性介质材料(RAM)和烷基化二醇硅(ADS) 作SPME毛细管，自动化直接提取血清中的多种苯二氮卓类药物。方法线性范围为50～ 50000 ng/mL，血清中奥沙西泮、替马西泮、去甲西泮和地西泮的LOD分别为26 ng/mL、29 ng/mL、22 ng/mL和24 ng/mL，回收率为97.1%～98.0%。Oliveira 等建立了SPME-GC-MS方法测定血浆中的地西泮。SPME程序：用聚二甲硅氧烷纤维(膜厚度100 um)直接萃取，250 μL血浆加入10%氯化钠溶液，4.25 mL磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L，pH 6.9)改性，萃取温度55℃，磁力搅拌器转速2500 r/min，萃取时间30 min，然后在GC进样口250℃解吸附10 min。方法LOQ为10.0 ng/mL，CV小于14.0%，回收率大于80%。Reubsaet等应用SPME-GC方法分析尿和血浆中的奥沙西泮、地西泮、去甲基西泮、氟硝西泮和阿普唑仑。萃取条件：正辛醇包被固定在聚丙烯酸酯纤维作用4 min，将萃取纤维置于样品(pH 6.0)中萃取15min。尿液样品加入0.3g/mL氯化钠后再萃取，血浆样品宜先沉淀蛋白后再萃取，但血浆回收率低于尿液，回收率为93%～ 11%，尿液样品的LOD为0.01 ～0.45 umol/L，血浆样品LOD为0.01 ～0.48 umol/L。Aresta 等建立了SPME-HPLC测定尿液中地洛西泮的方法。13.5 mL尿液加入1.5 mL 磷酸盐缓冲液(0.5 mol/L， pH 9.7)， 直接SPME 30 min，然后转入乙腈-水(40+60，v/v) 静态解析附3 min，最后将萃取针暴露于流动相4s，完成上样。研究比较了聚乙二醇和聚二甲基硅氧烷/二乙烯苯两种萃取模板，发现后者更适合该药物的分析。方法LOD为5 ng/mL， LOQ为27 ng/mL，回收率为90%，CV 为6.%±0.5%。

4)液相微萃取(liquid phase microextraction，LPME)

以LLE为基础的LPME技术克服了传统LLE的诸多不足，仅使用微升甚至纳升级的有机溶剂即完成萃取分析，具有消耗有机溶剂少、省去所需相分离及合并过程、富集倍数大、可实现联用化、样品用量少等优点。

Ugland等用LPME结合GC分析尿和血浆中的地西泮及其主要代谢物(去甲地西泮)。微萃取装置包括多孔空心的聚丙烯纤维管、两根穿过隔膜的导引针和4 mL小瓶。充满萃取液的中空纤维管浸入样品液中，带有预浓缩待测物的萃取溶剂1 μL直接注入毛细管GC中进行分析。30 个样品可同时在振荡器中进行提取，具有较好的样品处理能力。应用氮磷检测器(NPD)进行检测，LOD可达到0.02 mmol/mL和0.115 mmol/mL；血液中地西泮和去甲地西泮LOQ为0.08 nmol/mL和0.38 nmol/mL，尿液中去甲地西泮LOQ分别为0.07 nmo/mL；回收率为84%～ 102%，CV 为3.5%～ 6.6%。

5)分子印迹技术(molecular imprinting technique， MIT)

MIT是将与模板分子结合的功能单体与交联试剂共聚，形成人工模拟抗体的高选择性和识别性的印迹聚合物。

Ariffin等应用甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯制备了地西泮的分子印迹聚合物(MIP)，用于提取、净化毛发中的苯二氮卓类药物。MIPs制备过程如下：溶解地西泮、乙二醇二甲基丙烯酸酯和乙二醇二甲基丙烯酸酯于不含氯仿的乙醇中，加入偶氮二异丁腈，完全溶解后氮吹5 min，冰浴冷却，在4℃恒温以便于形成模板单体复合物，长波紫外线灯辐照24h后，将聚合物转移到60℃水浴24h，完成聚合物固化。以相同的方式但无模板(地西泮)制备非印迹聚合物(NIP)。 将MIP和NIP碾碎，过筛至25～38um大小，用甲醇-乙酸(9+1，v/v)将模板从聚合物颗粒彻底洗脱，真空干燥备用。将20 mg MIP装SPE小柱，作分子印迹固相萃取(MISPE)净化。用甲醇-25%氢氧化铵水溶液(20+1，v/v)超声提取头发中地西泮1h，室温过夜，将提取液蒸发，用甲苯复溶，过MISPE小柱，用乙酸-乙腈(15+85，v/v)洗脱。MISPE 结合容量为110 ng/mg (地西泮/聚合物)，回收率为93%，RSD为1.5%，LOD 和LOQ分别为0.09 ng/mg和0.14 ng/mg。

6)免疫亲和固相微萃取(immunoaffinity solid phase microextraction)

免疫亲和固相微萃取与SPME原理相似，在微萃取小柱上包被待测物特异性抗体，这样萃取小柱可选择性地提取待测溶液中的药物，只不过这种选择性萃取是基于抗原抗体相互吸引的作用力，而不是基于物质的理化性质相互作用。

Lord等建立 了测定苯二氮卓类药物的免疫亲和固相微萃取探针。将相应抗体以共价键固定在玻璃纤维上，抗体与药物亲和常数为109～1010/mol， LOD为0.001 ～0.015 ng/mL，但未对实际样品进行测定。

7) QuEChERS (Quick， Easy， Cheap， Effective， Rugged， Safe)

QuEChERS是在MSPD技术的基础上发展起来的一种用于农产品检测的快速样品前处理技术。其步骤可概括为：样品粉碎；溶剂提取分离；加入MgSO4等盐类除水；加入乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)等吸附剂除杂；上清液进行分 析等五个步骤。

Usui等建立了QuEChERS净化，同时测定血液中苯二氮卓类及其代谢物、巴比妥类、吩噻嗪类的分析方法。前处理分为萃取和分散固相萃取两步：基质中加入硫酸镁和乙酸钠，不锈钢珠振荡提取；提取液离心后，上层乙腈层用C18、仲二胺和硫酸镁作分散固相萃取净化，离心后的上清液用LC-MSMS分析。方法LOD为0.04～4.43 μg/L，LOQ为1～14.7μg/L，回收率为39%～127%，日内和日间CV分别在0.5%～12.7%、1.5%～16.6%之间。渠岩等采用QuEChERS技术建立了畜禽肉中阿普唑仑、咪达唑仑、三唑仑、艾司唑仑、奥沙西泮、地西泮、硝西泮、氯硝西泮、卡马西平、利多卡因、苯巴比妥、异戊巴比妥和司可巴比妥等13 种镇静药物残留量的分析方法。称取禽畜肉15.0g于50 mL Dis QuE提取管中，加入15 mL 1%乙酸乙腈溶液，涡旋振荡5 min， 再离心，吸取7.5 mL乙腈提取液至15 mL DisQuE清除管(含有150 mg C18)中，涡旋振荡30s，离心吸取100 μL上清液加入900 μL 10%甲醇，超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS) 分析。13 种镇静药物的LOD为0.05～3 μg/kg，回收率为77.4%～ 100.2%，RSD为1.3%～ 14.8%。

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