16.2.1.8 线性范围和测定低限

根据 每种硝基咪唑类药物的灵敏度，用水配成一系列标准工作溶液，牛奶、奶粉样品空白溶液配成一系列基质标准工作溶液，在选定的色谱条件和质谱条件下进行测定，进样量15μL，用分析物峰面积与选定内标的峰面积比率对基质标准工作溶液中被测组分的浓度作图，其线性范围(相对于牛奶样品为MNZOH 0～20μg/kg、HMMNI 0～50μg/kg，其余0～10μg/kg，相对于奶粉为MNZOH 0～100μg/kg、HMMNI 0～250μg/kg，其余0～50μg/kg)、线性方程和线性相关系数见表16-5。由不同基质的线性方程可知基质对MNZOH和RNZ的测定影响不大，对HMMNI、MNZ和DMZ有一定的干扰，方法采用基质添加标准来校对样品的含量以消除基质的干扰。

表16-5 硝基咪唑类药物不同基质溶液的线性范围、线性方程和相关系数

根据最终样液所代表的试样量，定容体积，进样量和进行测定时所受的干扰情况，以添加法确定本方法牛奶中甲硝哒唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑检测低限为0.5ug/kg，羟基甲硝唑检测低限为1ug/kg，1-甲基-2-羟甲基-5-硝基咪唑为2.5μg/kg；奶粉中甲硝哒唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑检测低限2.5μg/kg，羟基甲硝唑为检测低限5μg/kg，1-甲基-2-羟甲基-5-硝基咪唑检测低限为10μg/kg。

16.2.1.9 方法回收率和精密度

用不含甲硝哒唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑及其代谢物的牛奶和奶粉样品进行添加回收率和精密度实验，样品中添加不同浓度标准后，摇匀，使样品充分吸收，然后按本方法进行提取和净化，用液相色谱-串联质谱测定，其回收率和精密度见表16-6和表16-7。实验数据表明，本方法回收率数据全部在88.3%～104.4%之间，室内四个水平相对标准偏差均在3.67～9.61%以内。

16.2.1.10 重复性和再现性

在重复性试验条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r)，如果差值超过重复性限(r)，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。在再现性试验条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)。被测物的含量范围、重复性和再现性方程见表16-8和表16-9。

表16-6 牛奶室内验证数据

表16-7 奶粉室内验证数据

表16-8 牛奶样品五种分析物的含量范围及重复性和再现性方程

表16-9 奶粉样品五种分析物的含量范围及重复性和再现性方程