19.2.1.1 适用范围

适用于牛甲状腺和牛肉中硫脲嘧啶、甲基硫脲嘧啶、正丙基硫脲嘧啶、它巴唑、巯基苯并咪唑残留量的液相色谱-串联质谱测定。方法检出限均为2μg/kg。

19.2.1.2 方法原理

目标物残留用乙酸乙酯提取，Sep-Park Amino Propyl固相萃取柱净化，用4-氯-7-苯并呋咱衍生化，再用Oasis HLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱检测。

19.2.1.3 试剂和材料

甲醇、乙腈、乙酸乙酯均为：色谱纯；磷酸氢二钠(Na2HPO4：12H2O)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、乙酸、浓盐酸、氢氧化钠、三氯甲烷、正已烷、乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2O8Na2·2H2O)均为优级纯；巯基乙醇为分析纯。

4-氯-7-苯并呋咱(4-Chloro-7-nitrobenzo-2-furazan，NBF-CI)，C6H2CIN3O3：含量≥9%。无水硫酸钠：使用前650℃灼烧4h。

磷酸盐缓冲溶液：pH=8，0.2mol/L。称取67.7g磷酸氢二钠和1.5g磷酸：二氢钾，用水溶解，定容至1000mL。
盐酸溶液：0.2mol/L。量取17mL浓盐酸，用水定容至1000mL。

氢氧化钠溶液：1mol/L。称取40g氢氧化钠，用水溶解，定容至1000mL。

衍生剂：5mg/mL。称取0.05g 4-氯-7-苯并呋咱(NBF-CI)溶于10mL甲醇，现用现配。

乙二胺四乙酸二钠溶液：0.1 mol/L称37.2g乙二胺四乙酸二钠溶于1000mL水中。

洗脱液：含3%乙酸的甲醇和三氯甲烷(15+85，v/v)混合溶液。吸取3mL乙酸于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀。吸取该溶液15mL于100mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至刻度，混匀。

定容液：含0.3%乙酸的乙腈水溶液。吸取0.3mL乙酸和15mL乙腈于100mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。

标准物质：硫脲嘧啶、甲基硫脲嘧啶、正丙基硫脲嘧啶、它巴唑、巯基苯并咪唑，纯度≥99%。

内标标准物质：甲基巯基苯并咪唑(2-methoxethox-mercaptobenzimidazole，MEMBI)，纯度≥99%。

标准贮备溶液：1.0mg/mL。称取适量的硫脲嘧啶、甲基硫脲嘧啶、正丙基硫脲嘧啶、它巴唑、巯基苯并咪唑标准物质，分别用甲醇配成1.0mg/mL的标准贮备液。避光-18℃保存，可使用6个月。

混合标准工作溶液：0.1μg/mL。吸取每种适量标准贮备溶液，用甲醇稀释成0.1μg/mL的混合标准工作溶液，避光-18℃保存，可使用3个月。

内标标准贮备溶液：1.0mg/mL称取适量的甲基巯基苯并咪唑标准物质，用甲醇配成1.0mg/mL的标准贮备液，避光-18℃保存，可使用6个月。

内标标准工作溶液：0.1μg/mL。吸取内标标准贮备溶液，用甲醇稀释成0.1μg/mL的内标标准工作溶液，避光-18℃保存，可使用3个月。

Sep-Park Amino Propyl固相萃取柱或相当者：500mg，3mL。使用前用20mL正已烷预处理，保持柱体湿润。Oasis HLB固相萃取柱或相当者：60mg，3mL。使用前分别用5mL甲醇和10mL水预处理，保持柱体湿润。

19.2.1.4 仪器和设备

液相色谱-串联四极杆质谱仪，配有电喷雾离子源；分析天平：感量0.1mg和0.01g；液体混匀器；固相萃取装置；氮气吹干仪；恒温振荡水浴；真空泵：真空度应达到80kPa；微量注射器：25μL，100μL；棕色具塞离心管：25mL，50mL；pH计：测量精度±0.02pH单位；储液器：50mL；离心机：转速大于4000r/min。